Resumen
- O capim-elefante (Pennisetum purpureum), espécie de grande potencial bioenergético, tem mostrado contribuições significativas da fixação biológica de nitrogênio (FBN), no entanto, pouco se sabe sobre a diversidade funcional das bactérias diazotróficas associados a esta planta. Considerando a importância ecológica e econômica do uso da associação de bactérias promotoras de crescimento vegetal (BPCV) com plantas de capim-elefante, este trabalho tem por objetivo identificar e selecionar bactérias diazotróficas eficientes na solubilização de fosfato inorgânico (SFI) e produtora de compostos indólicos. Neste estudo foram testados 257 isolados obtidos durante o processo de isolamento de bactérias diazotróficas das cultivares de capim-elefante Camerron e CNPGL-F06 coletadas no campo experimental da Embrapa Agrobiologia/ Seropédica-RJ pa ra avaliação da diversidade funcional destes microrganismos. Acapacidade de SFI foi testada em meio de cultura GL sólido, onde foram adicionadosao meio 10 ml de K2 HPO4 (10 %) e 20 ml de CaCl2(10 %) para formação de precipitado insolúvel de CaHPO4 . Após o cultivo das bactérias em meio DYGS uma alíquota de20 ml foi retirada e inoculada, em forma de gota, na superfície da placa de Petri contendo meio de cultura GL sólido. Após 5 dias de incubação a 30°C, avaliou-seformação do halo transparente ao redor das colônias, o que indica a solubilização do fosfato adicionado ao meio de cultura. Nos testes de produção de compostos indólicos os isolados foram cultivadas em meio DYGS com adição de L-triptofano, sob agitação (120 rpm) e ausência de luz, com temperatura de 30°C. Alíquotas de 1m l foram retiradas após 48 e 72 horas de cultivo e centrifugadas a 10.000 rpm por 15 minutos. Em microplacas de 96 poços, uma alíquota de 150 ml do sobrenadante, com 3 repetições de cada amostra, foi misturado a 100 ml do reagente de Salkowski (1 ml de 0,5 M FeCl3 em 49 ml de ácido perclórico 35 %) previamente preparado. As amostras permaneceram no escuro por 30 minutos sob temperatura ambiente e em seguida foi realizado a leitura de absorbância em um leitor de microplaca (Labsystem iems reader MF, Labsystem) com um comprimento de onda de 540 nm. A quantificação de compostos indólicos foi avaliada utilizando da curva de calibração preparada com diluições seriadas de uma solução padrão de acido-3-indol acético com concentrações entre 0 a 50 mg ml-1. Dos 257 isolados de bactérias diazotróficasoriundos de plantas de capim-elefante, 54 apres entaram capacidade de solubilizar o precipitado de CaHPO4 em meio sólido. Todos os isolados bacterianos e estirpes-tipotestados foram capazes de produzir compostos indólicos na presença de L-triptofano nas condições testadas. O manejo de BPCV associadas a plantas de capim-elefante pode ser uma alternativa para diminuição do uso de fertilizantes químicos fosfatados, além de favorecer uma melhor absorção de nutrientes devid