Resumen
- La industria cuyícola del departamento de Nariño representa el 89.64% de total de la producción en Colombia. La principal limitante de origen infeccioso en estos sistemas es la Yersiniosis causada por Yersinia pseudotuberculosis que ocasiona pérdidas económicas por los altos índices de morbilidad y mortalidad, 8% y 20%, respectivamente. Las especies patógenas del género Yersinia utilizan el sistema de secreción Tipo III (SSTIII) para la secreción y translocación de proteínas al contacto con las células eucariotas del huésped. El SSTIII está compuesto por tres subgrupos de proteínas: el inyectosoma Ysc (secreción de Yop), las translocadoras y Yop efectoras/proteínas externas de membrana de Yersinia. El SSTIII es codificado por el plásmido de virulencia (pYV) de 70 kb. El objetivo de este estudio fue evaluar la antigenicidad de proteínas de secreción en 69 aislamientos de Y. pseudotuberculosis, portadores de pYV. Para el desarrollo de este trabajo, inicialmente, se realizó la detección de dos genes de origen plasmídico yadA y virF por reacción en cadena de la polimerasa (PCR). De los aislamientos positivos se seleccionaron 27, para realizar extracción de las fracciones insolubles proteicas. Para medir la capacidad de generar una respuesta inmune de estas proteínas, la fracción insoluble de cada aislamiento se separó por electroforesis (SDS-PAGE) y la evaluación serológica, para la identificación de las proteínas antigénicas, se realizó por Western blot, enfrentándolas a sueros policlonales provenientes de cuyes inmunizados experimentalmente. Los aislamientos bacterianos que de acuerdo a la reactividad antigénica generaron mayor respuesta fueron: YPCC007, YPCC015 y YPCC021 tanto con sueros homólogos como heterólogos. Las bandas proteicas reconocidas presentaron concordancia en el peso molecular con factores de virulencia importantes en la patogenia de Yersinia, como: YopB (41 kDa), YopD (35 kDa), proteínas de transmembrana involucradas en la translocación; también fueron halladas proteínas de 32.5 kDa, 35.5 kDa y 81.7 kDa que por peso molecular están próximas a YopJ, YopT y YpkA respectivamente, que hacen parte del grupo de las proteínas efectoras. La antigenicidad de las proteínas se puede relacionar con la capacidad Inmunogénica, por tanto podrían ser utilizadas en la formulación de inmunógenos contra Y. pseudotuberculosis en cuyes.