El cultivo de fresa en Guatemala enfrenta graves problemas fitosanitarios por el hongo Neopestalotiopsis clavispora, lo que hace necesario implementar técnicas de cultivo in vitro para obtener plantas libres de patógenos. La investigación se centró en adaptar protocolos de micropropagación a partir de ápices meristemáticos, evaluando combinaciones hormonales para el desarrollo y enraizamiento de variedades de fresa. Se empleó el medio Murashige & Skoog (MS) y se obtuvieron respuestas significativas en las variedades Festival y San Andreas. Festival mostró mejores resultados con BAP + IBA + GA₃ (1.0 mg/l + 0.1 mg/l + 0.05 mg/l) y enraizó con IBA + BAP (0.2 mg/l + 0.1 mg/l). San Andreas presentó mayor brotación con BAP + IBA + GA₃ (0.5 mg/l + 0.025 mg/l + 0.05 mg/l) y enraizó con la misma combinación de IBA + BAP. Ambas variedades alcanzaron un 100% de sobrevivencia en trasplante a invernadero, y las pruebas de patogenicidad confirmaron la eliminación del hongo en el material propagado.